Hemocultivos

Cualquier paciente en un entorno hospitalario que desarrolle fiebre o evidencia de sepsis debe someterse a cultivos de sangre. Dado que la sepsis es una de las principales causas de muerte, la identificación rápida de la infección del torrente sanguíneo es obligatoria para realizar una terapia antibiótica adecuada. Puede ser necesario realizar múltiples series de cultivos de sangre y también se deben considerar cultivos de otros sitios, por ejemplo, orina, piel y garganta.

Cómo tomar cultivos de sangre

Precauciones

• Se deben utilizar técnicas asépticas para que las bacterias de la piel no contaminen los frascos de cultivo.

• Idealmente, la piel debe lavarse con jabón y enjuagarse con agua estéril. Esto debe ser seguido por la aplicación de una solución a base de yodo, que luego debe lavarse después de 30 segundos de secado, con una solución de alcohol al 70%. En la práctica, esto rara vez ocurre; sin embargo, se debe hacer todo lo posible por utilizar una técnica aséptica, por ejemplo, Betadine® y/o spray de alcohol y guantes.

• Se ha demostrado que las soluciones de clorhexidina alcohólica reducen los falsos positivos en cultivos de sangre en comparación con el povidona-yodo acuoso.¹

• The most common contaminants include Staphylococcus epidermidis, Corynebacterium spp., Propionibacterium spp. and Bacillus spp. (but not Bacillus anthracis).

Procedimiento

• Los frascos estándar para cultivos de sangre consisten en dos frascos: uno que contiene medio de cultivo aeróbico y el otro medio de cultivo anaeróbico.

• Por lo general, se deben inyectar al menos 10-15 mL en los frascos de cultivo de sangre (esto depende de los tipos de frascos utilizados).

• A menudo se toman volúmenes más pequeños de bebés y niños. Asignar 1 mL de sangre de un neonato en dos frascos, aeróbico y anaeróbico, ha demostrado mejorar el rendimiento del cultivo en comparación con 1 mL en un solo frasco aeróbico.²

• Los dispositivos de vacío más nuevos permiten la venopunción directa con transferencia de sangre a cultivos sanguíneos.

• En algunos hospitales, los flebotomistas a menudo toman cultivos de sangre.

• Los resultados de contaminación pueden ser más bajos si son tomados por clínicos más experimentados que por personal junior.

• Múltiples cultivos de múltiples sitios aumentan el rendimiento:
  

  • Esto es especialmente cierto en la endocarditis infecciosa.

  • Un ejemplo es tomar sangre de una fosa antecubital, 30 minutos después de la fosa antecubital opuesta y la última de un tercer sitio 30 minutos después.

• Los cultivos de sangre también se pueden tomar de líneas, por ejemplo, líneas de presión venosa central, líneas arteriales.

• Los estudios han demostrado que lo siguiente puede reducir las tasas de contaminación:³

  • Cumplimiento de un protocolo.

  • Muestreo por vía de venopunción periférica en lugar de a través de un catéter intravascular.

  • Uso de guantes estériles.

  • Limpieza de las tapas de los frascos de hemocultivo con antisépticos.

  • Inocular frascos de cultivo de sangre antes que otros tubos de sangre.

  • Muestras tomadas por un equipo de flebotomía.

  • Monitoreo de tasas de contaminación.

  • Proporcionar retroalimentación individual y reentrenamiento para aquellos con contaminantes.

• Un estudio ha demostrado que desarrollar un nuevo proceso para la recolección de cultivos de sangre, enfatizando una estricta atención a la técnica estéril, con el uso estandarizado de antiséptico cutáneo de clorhexidina, agujas estériles, guantes estériles, campos estériles y una lista de verificación de procedimientos, resultó en una reducción de la contaminación de cultivos de sangre por debajo del 3%.⁴

• Se ha demostrado que la descolonización universal con baños de clorhexidina resulta en una reducción significativa de la contaminación de cultivos sanguíneos.⁵

• One study has shown that using a new automated PCR assay for detection of Streptococcus pneumoniae, the GenomEra™ S. pneumoniae, puede llevar a que los resultados estén disponibles en 55 minutos, lo cual es obviamente significativamente más rápido que los métodos de identificación utilizados rutinariamente.⁶

Problemas con los cultivos de sangre

• La contaminación de los cultivos de sangre es un problema común y prevenible, especialmente en el departamento de emergencias.⁷

• Los cultivos de sangre falsos positivos debido a la contaminación de las muestras con bacterias de la piel son un problema común que puede llevar al uso innecesario de antibióticos, pruebas de laboratorio adicionales y un aumento en la duración de la estancia hospitalaria, lo que resulta en costos hospitalarios adicionales significativos.⁸

• Las tasas de verdaderos y falsos positivos para los cultivos de sangre varían, pero comúnmente cada una está en el rango del 5-10%.

• Se ha demostrado que el uso de equipos de flebotomía es efectivo para reducir las tasas de contaminación de cultivos sanguíneos.⁹

• Se ha demostrado que cambiar el método de recolección de cultivos de sangre a un proceso más estéril resulta en reducciones significativas en la contaminación de cultivos de sangre.⁷

• Existen varios tipos diferentes de sistemas de cultivo de sangre, tanto manuales como automatizados.

• Otros frascos de cultivo están disponibles y su uso depende del escenario clínico, por ejemplo, frascos de cultivo para tuberculosis o hongos.

• Se están introduciendo nuevas tecnologías que pueden llevar a la identificación rápida de patógenos en cultivos de sangre positivos.¹⁰¹¹

• Varias plataformas moleculares pueden identificar bacterias asociadas con infecciones del torrente sanguíneo mucho más rápidamente que los métodos estándar.¹²

• Una vez que se tomen los cultivos de sangre, deben ser etiquetados y enviados al laboratorio sin demora.

• En el laboratorio, las botellas se agitan e incuban a temperatura corporal. Si es fuera del horario, las culturas generalmente se incuban durante la noche.

• Los conjuntos básicos de cultivos se incuban durante 14 días y se realiza un cultivo ciego después de 3, 7 y 14 días o tan pronto como haya signos de crecimiento (por ejemplo, turbidez, hemólisis, colonias en pendiente de agar en botellas de Castaneda).

• Otros frascos pueden incubarse durante 7 días o hasta 3 semanas si se sospecha de endocarditis bacteriana subaguda (EBS)/organismos exigentes.

• La observación de las botellas, buscando un resultado positivo, se realiza al menos dos veces al día cuando se utilizan sistemas manuales.

• Los sistemas automáticos están disponibles y se están utilizando cada vez más. Un ejemplo es el Sistema de Cultivo de Sangre BacT/ALERT® donde un crecimiento positivo libera CO₂ which is detected by a sensor that alerts the laboratory staff (bottles are placed in a special cabinet and linked to the patient by a barcode).

• Se ha demostrado que los nuevos frascos BacT/ALERT® FAPlus y FNPlus BC, que contienen perlas poliméricas que se unen a antibióticos, mejoran el diagnóstico de bacteriemia.¹³

• Si se detecta crecimiento, las botellas se subcultivan y se realiza una tinción de Gram. A partir de esto, se realizan las sensibilidades relevantes. En algunos casos, el organismo puede identificarse en pocas horas después de detectar un resultado positivo, utilizando la tinción de Gram y pruebas adicionales.

• Pruebas adicionales que pueden realizarse directamente en el cultivo de sangre para acelerar la identificación incluyen agrupamiento estreptocócico, pruebas de coagulasa, pruebas de antígenos para neumococo y meningococo, etc.

• El microbiólogo revisará los resultados e informará al personal involucrado en el cuidado del paciente. Así, los pacientes comenzarán la terapia provisional y esta se confirmará una vez que se conozcan las sensibilidades.

• Por lo general, si hay un crecimiento, generalmente hay solo un organismo; sin embargo, muy raramente, puede haber más de un organismo y el laboratorio realizará pruebas de sensibilidad y más pruebas en todos.